实时荧光定量pcr仪-精塞玛-pcr仪

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    2022-7-28

王经理
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pcr反应过程中产生的dna拷贝数是呈指数方式增加的,随着反应循环数的增加,终pcr反应不再以指数方式生成模板,从而进入平台期。在传统的pcr 中,pcr仪,常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测pcr反应的终扩增产物,因此用此终点法对pcr产物定量存在不---之处。在real-time q-pcr中,对整个pcr反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号,实时荧光定量pcr仪,随着反应时间的进行,监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲 线。


pcr仪是什么以及分类:

通过pcr(聚合酶链式反应)技术,对特定dna进行扩增的仪器。

普通pcr仪:只进行pcr扩增的pcr仪,实际上是一个温控设备。

实时荧光pcr仪:在普通pcr仪的基础上增加荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。

普通pcr仪只能实现dna的扩增,分析检测需要在扩增之后。而扩增后到检测分析的这个过程,pcr仪多少钱,因为要将样品中仪器中取出来,所以容易受到污染,同时也容易污染环境。

实时荧光pcr仪:在作为温控设备的同时加入荧光分析系统。

在扩增的同时,通过前期准备工作的时候,pcr扩增体系中加入荧光集团,而后通过荧光信号采集系统实时采集,存储数据,将检测分析步骤集中到仪器上,减少人员后续的检测操作,降低了污染和被污染的风险。





下面的步骤是pcr的反应原理,同时也是pcr仪的工作原理。

简单的说,就是通过高温变性,退火复性,延伸三个部分。

双链dna在一定的环境中,通过在90-95℃变性,形成单链,然后退火降温到40-60℃,

在引物及其他辅助因子的作用下,使其初步结合,再快速升温至70-75℃,在相关酶的催化作用下,合成双链。完成一个扩增循环。

由此我们也可以得出pcr仪的一个主要参数:温度,温度示值是否准确,升温速率的快慢是影响其的一个主要因素。

具体要加什么缓冲液,进口pcr仪,要加什么引物,以及其他一些辅助因子,后续我们再去了解。




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