1. 模板---模板(靶基因或样品dna)---的量与纯化程度是pcr成败与否的关键环节之一。一般---检测标本，可采用快速简便的方法溶解细胞，裂解病原体，---除去染色体的蛋白质使靶基因游离，直接用于pcr扩增。dna模板提取一般采用异---胍或蛋白酶k法，要防止核糖---酶(ribonuclease，rnase)降解rna。2. 引物pcr产物的特---取决于引物与模板dna互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板dna序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链作引物。每条引物链的浓度为0.1~1μmol或10-100pmol，以反应所需要的低引物量的浓度为好。3. dna聚合酶taqdna聚合酶基因全长2496个碱基，75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷酸，在pcr循环的高温条件下仍能保持较高的活性和---的热稳定性，温度过高(90℃以上)或过低(22℃)都可影响taqdna聚合酶的活性。目前，有两种taqdna聚合酶供应，一种是从栖热水生中提纯的天然酶，另一种为大肠菌合成的基因工程酶
实时荧光定量pcr仪，pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。
pcr仪有48孔、96孔，pcr仪厂家，384孔，每一个孔都可以放一个样品，pcr扩增仪，自然我们上面所说的温度参数，还是有一些不全。这里大致总结一下：温度示值误差、温度均匀性、温度冲量、温度持续时间准确度、平均升降温速率，pcr仪多少钱，升降温速率等。
以上，是作为一个pcr仪温控设备来说，我觉得可能的参数。
而作为实时荧光pcr，检测系统的参数是不是也要确认？检测系统的性能是否满足我们分析的需要。
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