pcr技术的本质是体外---扩增,加热使双链dna解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板dna杂交,在taq dna聚合酶,dntps,pcr仪,mg2+和合适ph缓冲液存在条件下延伸引物,重复 “变性***退火***引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的---拷贝数。
普通的pcr仪
一次pcr扩增只能运行一个特定退火温度的pcr仪,又叫传统的pcr仪。
用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。
(1)梯度pcr仪: 一次pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),实时荧光定量pcr仪,通常为12种温度梯度的普通pcr仪。
用途:研究未知dna退火温度的扩增。
(2)原位pcr:将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶dna的定位分析,在细胞内实现基因扩增的普通pcr仪。
用途:用于在细胞的靶dna所在位置上进行基因扩增。
性---的诊断:pcr技术在性---中尤其适用于检测一些培养周期长或缺乏检测手段的病原体。遗传性---的诊断:遗传性---的发病基础是---分子结构变异与---的表达产物,如蛋白质或酶类分子结构的改变。pcr技术的原理恰好为检测这一类---提供了有效的手段。的诊断:pcr技术用于癌基因和抑癌基因缺失与点突变的检测以及相关---基因的检测,为---诊断带来了简便快速、准确的方法,同时也为相关---的与预后提供了监控手段。移植配型:随着pcr技术的出现,定量pcr仪,分子生物学技术被引入到hla配型领域,pcr仪多少钱,通过pcr扩增仪可以建立快速、准确的hla基因分型方法,满足---移植配型的需要。
超早期用及---的研究与开发实时荧光定量pcr方法测定是---中------的含量,因此不必等到体内产生,同时,由于其灵敏度与elisa相比不可同日而语,在---的早期,即---中---含量很低时就可以测定。因此就出现了一个新的领域,即在---或---含量很低时如何用药,用什么药以及用---等进行研究,为将---消灭在超早期作出贡献。
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