pcr技术的原理类似于dna的天然过程,其特---依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成 [2] 。1. 模板dna的变性模板dna经加热至93℃左右一定时间后,实时荧光定量pcr仪,使模板dna双链或经pcr扩增形成的双链dna解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。2. 模板dna与引物的退火(复性)模板dna经加热变性成单链后,荧光定量pcr仪价格,温度降至55℃左右,引物与模板dna单链互补序列配对结合。3. 引物的延伸dna模板-引物结合物在taqdna聚合酶的作用下,以dntp为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留原理,合成一条新的与模板dna链互补的半保留链。
根据dna扩增的目的和检测的标准,可以将pcr仪分为普通pcr仪,梯度pcr仪,原位pcr仪,实时荧光定量pcr仪四类。1. 普通pcr仪一次pcr扩增只能运行一个特定退火温度的pcr仪称作传统pcr仪,也叫普通pcr仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科学研究、教学、医学---、检验检疫等机构。2. 梯度pcr仪---pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的pcr仪称作梯度pcr仪。因为被扩增的不同dn---段,其适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而---pcr扩增,就可以筛选出表达量高的适退火温度,进行有效的扩增。用于研究未知dna退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间。梯度pcr仪在不设置梯度的情况下也可以做普通pcr扩增。主要应用于科研、教学机构。
软件功能
pcr仪一般都可以通过仪器提供的软件自定义一些参数和程序。温度设置功能、时间增减功能是大多数仪器都具有的基本功能。有些大屏的pcr仪还可以显示温度变化曲线。对于一般的实验来说,pcr仪,基础的软件功能就够用了。功能越多、越智能的仪器,pcr仪多少钱,价格也越贵。
价格、维修、售后
与其他仪器一样,参数不同、功能不同、品牌不同的pcr仪价格差别是很大的。采购时需要根据实际需要选择的产品。另外,仪器厂家或的售后服务承诺、维修政策也要考虑在内。
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