在使用有些厂家5通道的荧光定量仪时,pcr仪,为了---实验结果的性和准确性都要在实验中使用rox(一种荧光染料)或的reference dye,这些荧光染料都必须单独使用一个检测通道。这样以来,真正能检测多重pcr荧光信号的有效通道只有4个,而且使用校正染料可能会增加后期的使用成本。有的荧光定量pcr的检测通道是只为自已厂家的的荧光染料或试剂开放的,有效检测通道也绝非像宣传资料中宣称的那么多。在购买前确认荧光定量pcr仪器的有效检测通道尤为重要,不能单单只听宣传。
实时荧光定量pcr仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成pcr-dna/rna实时荧光定量检测系统。样品到达域值水平所经历的循环数称为ct值(---点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为,这样可以获得准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
地中海(thalassemia)是一种遗传性慢性溶血,定量pcr仪,是上常见且发病比高的一种单基因遗传病。在两广、贵州、四川等地发病率较高,在广西等地---15%。地中海是由于基因突变造成珠蛋白的不平衡,使结构正常的肽链合成量减少甚至没有合成表现为溶血性。接受累基因种类分为α、β、γ等,其中以 α、β地贫为常见,危害了大。珠蛋白基因簇位于人6号染色短臂上,有两个重复基因基因位于α1、α2、两个α基因及其旁侧序列有很大的同源性,易出现染色体不等交换,导致α基因缺失-α地贫。α地贫基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同时缺失及非缺失型地贫。可以应用pcr技术扩增α1、α2基因从而检测这些基因是否缺失、突变等,荧光pcr仪,从而对α型地中海作出诊断。β地中海基因缺陷主要表现为基因序列中单一核苷酸的突变,或少数碱基的缺失、插入,使正常β珠链合成减注或缺失。应用位点特---寡核苷探针(aso)进行pcr产物斑点杂交即可对其作出诊断。
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